Обеспечение биологической безопасности при лиофилизации микроорганизмов I-II групп патогенности

Показано наличие единичных клеток патогенов высушиваемого образца в смывах, взятых с поверхностей камеры сублимационных установок после завершения лиофилизации, что может повлечь за собой возможность выброса в виде аэрозоля жизнеспособных клеток лиофилизируемых микроорганизмов и привести к созданию аварийной ситуации, опасной для персонала. Предложено использовать дополнительное изолирующее оборудование - ламинарное укрытие, оснащенное HEP A-фильтрами класса H14, назначением которого является обеспечение защиты оператора и окружающей среды при работе с патогенными биологическими агентами. Смывы, сделанные с внутренних поверхностей ламинарного укрытия и лиофильных установок по окончании работы, давали отрицательные результаты, что сводило до минимума риск образования аэрозоля в помещении бактериологического бокса. Подобраны средства индивидуальной защиты, дезинфектанты для обработки оборудования и конечного продукта, разработан алгоритм действий персонала, что позволило существенно повысить уровень защиты от патогенов сотрудников лабораторий и окружающей среды.

лиофилизация, штаммы микроорганизмов, биологическая безопасность, технологии хранения, сублимационные установки камерного типа, ламинарное укрытие, дезинфектанты, lyophilization, microorganism strains, biological safety, storage technologies, chamber-type sublimation machines, laminar box, disinfectants

1. Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасность): СП 1.3.3118-13. М., 2013.

2. Высокоэффективные фильтры очистки воздуха (HEPA и ULPA): ГОСТ Р ЕН 1822-2-2010. Часть 1. Классификация, методы испытания, маркировка. Введены в действие от 01.12.2011. М.: Стандартинформ, 2011. 19 с.

3. Высокоэффективные фильтры очистки воздуха ЕРА, HEPA и ULPA: ГОСТ Р ЕН 1822-3-2012. Часть 3. Испытания плоского фильтрующего материала. Введены в действие от 01.12.2013. М.: Стандартинформ, 2014. 33 с.

4. Грачева И.В., Осин А.В. Механизмы повреждения бактерий при лиофилизации и протективное действие защитных сред // Проблемы особо опасных инфекций. 2016. № 3. С. 5-12.

5. Гришина Т. А., Тимофеева Е.В., Спиридонова В. А. Оценка результатов хранения музейных штаммов возбудителей сапа в течение длительного периода // Проблемы особо опасных инфекций. 2004. № 1. С. 40-42.

6. Жилченко Е.Б., Жаринова Н.В., Сердюк Н.С., Коняева О. А., Гаврилова О.Н., Звягинцева М. А., Осипов О.А. О необходимости использования дополнительного защитного оборудования при лиофилизации возбудителей инфекционных заболеваний I-II групп патогенности // Материалы II Всероссийской научнопрактической конференции «Актуальные проблемы болезней, общих для человека и животных», 5-6 апреля 2017 г. Ставрополь, 2017. С. 311-313.

7. Куплетская М.Б., Нетрусов А.И. Жизнеспособность лиофилизированных микроорганизмов после 50 лет хранения // Микробиология. 2011. Т. 80. № 6. С. 842-846.

8. Матвеева Е.В. Сохранение генофонда фитопатогенных бактерий методом лиофилизации. М.: АГРО XXI, 2007. № 10-12. С. 28-30.

9. Озерская С.М., Кочкина Г.А., Иванушкина Н.Е., Запрометова К.М., Еремина С.С., Князева Е.В. Состояние коллекций микроорганизмов в России // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю.А. Овчинникова. 2006. Т 2. № 3. С. 51-61

10. Онищенко Г.Г., Кутырев В.В. Топорков А.В., Осин А.В. Современное состояние коллекционной деятельности, связанной с использованием возбудителей инфекционных болезней I-II групп патогенности // Проблемы особо опасных инфекций. 2010. № 103. С. 5-10.

11. Осин А.В., Червякова Н.С., Валова Т.В. Лиофилизация штаммов патогенных микроорганизмов на сублимационных установках разного типа и оценка качества полученных препаратов // Проблемы особо опасных инфекций. 2016. № 3. С. 66-70.

12. Похиленко В.Д., Баранов А.М., Детушев К.В. Методы длительного хранения коллекционных культур микроорганизмов и тенденция развития // Известия ВУЗов. Поволжский регион. Медицинские науки. 2009. № 4. С. 99-121.

13. Правила производства и контроля качества лекарственных средств: ГОСТ Р 52249-2009. Введены в действие от 20 мая 2009 г. № 159-ст.

14. Саяпина Л.В., Соловьев Е.А., Горяев А. А., Бондарев В.П. Изучение иммунобиологических свойств вакцинного штамма Francisella tularensis 15 НИИЭГ в условиях длительного хранения // Проблемы особо опасных инфекций. 2015. № 2. С. 87-91

15. Червякова Н.С. Оптимизация подходов к установлению аутентичности и консервации коллекционных штаммов патогенных микроорганизмов: автореф. дис. канд. биол. наук. Саратов, 2017. 177 с.

16. Червякова Н.С., Валова Т.В., Осин А.В. Использование лиофильных аппаратов камерного типа в коллекциях патогенных микроорганизмов // Проблемы особо опасных инфекций. 2014. № 3. С. 65-68.

17. Чистые помещения и связанные с ними контролируемые среды: ГОСТ Р ИСО 14644-1-2017. Часть 1. Клас сификация чистоты воздуха по концентрации частиц. Введены в действие от 12.01.2018. 30 с.

18. Ashwood-Smith M.J. Low temperature preservation in medicine and biology. Tunbridge Wells: Pitman Medical. 1980. 323 p.

19. Donev T. Metods for Conservation of Industrial Microorganisms. Sofia, 2001. 93 p.