Разработка способа идентификации V. рагаhaemolyticus с помощью ПЦР в режиме реального времени
Аннотация
Бактерии V. parahaemolyticus - галофильные микроорганизмы, которые могут быть причиной возникновения острого кишечного заболевания у людей, протекающего по типу пищевой токси-коинфекции. Успех лечебно-профилактических и санитарно-эпидемиологических мероприятий, направленных на предотвращение распространения «галофилезов» во многом зависит от своевременной точной идентификации штаммов вибрионов, выделяемых от больных, из морепродуктов и при мониторинге объектов окружающей среды. В данной работе представлен способ идентификации штаммов вида V. parahaemolyticus методом ПЦР в режиме реального времени (Real-Time PCR), который включает выделение хромосомной ДНК из исследуемого материала, постановку ПНР со сконструированными нами праймерами, специфичными к участку гена коллагеназы vppC, и зондом, позволяющим детектировать амплифицированный фрагмент и проводить учет полученных результатов в режиме реального времени.
Об авторах
Оксана Алексеевна Рыковская
ФКУЗ «Ростовский-на-Дону противочумный институт» Роспотребнадзора
Россия
Россия
М. В. Полева
ФКУЗ «Ростовский-на-Дону противочумный институт» Роспотребнадзора
Россия
Россия
О. С. Чемисова
ФКУЗ «Ростовский-на-Дону противочумный институт» Роспотребнадзора
Россия
Россия
А. Л. Трухачев
ФКУЗ «Ростовский-на-Дону противочумный институт» Роспотребнадзора
Россия
Россия
Список литературы
1. Лабораторная диагностика заболеваний, вызываемых парагемоли-тическими и другими патогенными для человека вибрионами: МУК 4.2.1793-03. М.: Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004. 26 с.
2. Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности: МУ 1.3.2569-09 М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2010. 51 с.
3. Ребриков Д.В., Саматов Г.А., Трофимов Д.Ю. и др. ПЦР в реальном времени. М: Бином. Лаборатория знаний, 2009. 223 с.
4. Рыковская О.А., Чемисова О.С., Смоликова Л.М. и др. Дифференциация представителей Vibrio parahaemolyticus и Vibrio alginolyticus // Клиническая лабораторная диагностика. 2014. Т. 59. № 12. С. 50-55.
5. Чемисова О.С., Телесманич Н.Р., Рыковская О.А. и др. Масс-спектрометрический анализ как метод идентификации и внутривидовой дифференциации Vibrio parahaemolyticus // Холера и патогенные для человека вибрионы: Материалы проблемной комиссии. Ростов-на-Дону. 2013. Вып. 26. С. 153-157.
6. Chakraborty R. et al. Species-specific identification of Vibrio fluvialis by PCR taigeted to the conserved transcriptional activation and variable membrane tether regions of the toxRgene / R. Chakraborty, S. Sinha, A.K. Muk-hopadhyay [et al.] // J. Med. Microbiol. 2006. Vol. 55. pp. 805-808.
7. Di Pinto A. et al. A collagenase-targeted multiplex PCR assay for identification of Vibrio alginolyticus, Vibrio cholerae, and Vibrio parahaemolyticus/ A Di Pinto, G. Ciccarese, G. Tantillo // J. of Food Protection. 2005. Vol. 68. № 1. pp. 150-153.
8. Khamesipour F. et al. Detection of Vibrio spp. in shrimp from aquaculture sites in Iran using polymerase chain reaction (PCR) / F. Khamesipour, E. Noshadi, M. Moradi [et al.] // J. AACL Bioflux. 2014. Vol. 7. № 1. pp. 1-7.
9. Panicker G. et al. Red-time PCR detection of Vibrio vulnificus in oysters: comparison of oligonucleotide primers and probes taigeting whA / G. Panicked A.K. Bej HI Appl. Environ. Microbiol. 2005. Vol. 71. № 10. pp. 5702-5709.
10. Reham A.A. et al. Specific Detection of Pathogenic Vibrio species in shellfish by using multiplex polymerase chain reaction / A.A. Reham., M.S. Amani // J. Global Veterinaria. 2012. Vol. 8. № 5. pp. 525-531.
Рецензия
Для цитирования:
Рыковская О.А., Полева М.В., Чемисова О.С., Трухачев А.Л. Разработка способа идентификации V. рагаhaemolyticus с помощью ПЦР в режиме реального времени. Здоровье населения и среда обитания – ЗНиСО. 2018;(3):48-50.
For citation:
Rykovskaya O.A., Poleeva M.V., Chemisova O.S., Trukhachev A.L. Development of a method for identifying of V. parahaemolyticus by real-time PCR. Public Health and Life Environment – PH&LE. 2018;(3):48-50. (In Russ.)
Просмотров:
207
.png)
Послать статью по эл. почте 