Подходы к усовершенствованию методов выделения и идентификации синегнойной палочки

Введение. По данным Всемирной организации здравоохранения Pseudomonas aeruginosa (синегнойная палочка) является микроорганизмом с высоким уровнем приоритетности в силу приобретенной антибиотикорезистентности и способности вырабатывать множество факторов вирулентности. Действующими нормативно-методическими документами регламентирован алгоритм обнаружения синегнойной палочки при санитарно-бактериологическом исследовании объектов. При этом приоритетной средой выступает среда Блеск лабораторного приготовления.

Цель исследования: усовершенствование методов выделения и идентификации P. aeruginosa (повышение эффек тивности выделения синегнойной палочки) за счет разработки оптимального состава сухой стандартной отечественной питательной среды для селективного выделения P. aeruginosa, модифицированной (среда Блеск).

Материалы и методы. Проанализированы нормативно-методические документы, регламентирующие к использованию перечень питательных сред для выявления P. aeruginosa. В этой связи использовались сухие питательные среды и среды лабораторного производства ФБУН ГНЦ ПМБ. Чувствительность, селективные и дифференцирующие свойства сред оценивались с использованием набора тест-штаммов микроорганизмов, полученных из Государственной коллекции патогенных микроорганизмов и клеточных культур (ГКПМ-Оболенск).

Результаты исследования. Разработана и внедрена в производство сухая отечественная питательная среда для селективного выделения P. aeruginosa, модифицированная (среда Блеск). Создана уникальная белковая основа (панкреатический гидролизат казеина, высушенный с твином, модифицированный), позволяющая повысить чувствительность среды и усилить специфический золотистый блеск ярко-красных колоний, который является важным диагностическим признаком при росте псевдомонад на этой среде. Оптимальные сочетания основных компонентов при разработке питательной среды Блеск способствовали эффективному росту всех тест-штаммов P. aeruginosa и высокой ингибиции грамположительных и большинства грамотрицательных бактерий, в том числе ТТХ-резистентных штаммов.

Заключение. Результаты исследований доказали, что сбалансированный состав среды Блеск обеспечивает рост и выявление низких концентраций P. aeruginosa и препятствует росту микробов-ассоциантов, что является значительным преимуществом при исследовании высококонтаминированных посторонней микрофлорой образцов, содержащих небольшое количество патогена.

1. Алексеева А.Е., Бруснигина Н.Ф., Махова М.А. Оценка механизмов устойчивости к антимикробным препаратам клинических штаммов Pseudomonas aeruginosa // РМЖ. 2023. № 10. С. 48–51

2. Носкова О.А., Савилов Е.Д., Чемезова Н.Н., Белькова Н.Л. Антибиотикорезистентность возбудителей генерализованных гнойно-септических инфекций у детей // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2020. T. 19. № 6. С. 56–61. doi: 10.31631/2073-3046-2020-19-6-56-61

3. Потапов А.Ф., Шамаева С.Х., Иванова А.А., Семенова С.В. Микрофлораран и резистентность к антибиотикам у пострадавших с термической травмой // Тихоокеанский медицинский журнал. 2023. № 1. С. 81–85. doi: 10.34215/1609-1175-2023-1-81-854

4. Tsolakidis S, Freytag DL, Dovern E, et al. Infections in burn patients: A retrospective view over seven years. Medicina (Kaunas, Lithuania). 2022;58(8):1066. doi: 10.3390/medicina58081066

5. Хохлова О.Е., Владимиров И.В., Козлов Р.С. и др. Молекулярно-генетические механизмы резистентности к антибиотикам основных возбудителей гнойно-воспалительных осложнений у больных с термическими ожогами // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2022. Т. 37. № 4. С. 187–193. doi: 10.3103/S0891416822040024

6. Гординская Н.А., Бруснигина Н.Ф., Алексеева А.Е., Борискина Е.В., Махова М.А., Шкуркина И.С. Микробиологический мониторинг в системе эпидемиологического надзора за инфекциями, вызванными Pseudomonas aeruginosa // Здоровье населения и среда обитания. 2025. Т. 33. № 1. С. 73–81. doi: 10.35627/2219-5238/2025-33-1-73-81

7. Jeschke MG, Pinto R, Kraft R, et al.; Inflammation and the Host Response to Injury Collaborative Research Program. Morbidity and survival probability in burn patients in modern burn care. Crit Care Med. 2015;43(4):808-815. doi: 10.1097/CCM.0000000000000790

8. Земко В.Ю., Окулич В.К., Дзядзько А.М. и др. Зависимость биопленкообразования микроорганизмов от особенностей инфекционного процесса // Вестник ВГМУ. 2021. № 2. С. 56–64. doi: 10.22263/2312-4156.2021.2.56

9. Беляева Е.В., Кряжев Д.В., Ермолина Г. Б., Шкуркина И.С., Стрельцова О.С. Характеристика микрофлоры, выделенной от пациентов урологического стационара // Медицинский альманах. 2025. Т. 84. №3. С. 126–137.

10. Ялунина М.Ю. Проблема антибиотикорезистентности клинических штаммов Pseudomonas aeruginosa у пациентов с тяжелой сочетанной травмой // Univer sum: Медицина и фармакология. 2024. Т. 107. № 2. С. 69–72.

11. Постников С.С., Теплова Н.В., Костылева М.Н., Грацианская А.Н. Инфекция Pseudomonas aeruginosa в клинической практике // Лечебное дело. 2024. № 3. С. 48–56. doi: 10.24412/2071-5315-2024-13171

12. Чеботарь И.В., Бочарова Ю.А., Маянский Н.А. Механизмы резистентности Pseudomonas aeruginosa и их регуляция // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2017. Т. 19. № 4. С. 308–317.

13. Скурихина Ю.Е., Зайцева Е.А., Сараговец А.А. Молекулярно-генетические особенности антибиотико-резистентности Pseudomonas aeruginosa // Тихоокеанский медицинский журнал. 2024. Т. 96. № 2. С. 47–50. doi: 10.34215/1609-1175-2024-2-47-50

14. Склеенова Е.Ю., Азизов И.С., Шек Е.А., Эйдельштейн М.В., Козлов Р.С., Дехнич А.В. Pseudomonas aeruginosa в РФ: история одного из наиболее успешных нозокомиальных патогенов // Клиническая микробиология и антимик робная химиотерапия. 2018. Т. 20. № 3. С. 164–171.

15. Асташкин Е.И., Лев А.И., Ершова О.Н. и др. Три новых интегрона класса 1, обнаруженных в полирезистентных госпитальных штаммах Pseudomonas аeruginosa // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2019. № 1. С. 9–16. doi: 10.17116/molgen2019370119

16. Мартусевич А.К., Н.В. Абрамова, И.В. Бочарин, Maлышева К.С., Рычагова Е.М. Биологическая характеристика и резистентность к дезинфектантам псевдомонад, выделенных от пациентов ожогового стационара // Международный научно-исследовательский журнал. 2022. Т. 115. № 1. С. 34–37. doi: 10.23670/IRJ.2022.115.1.046

17. Артемьева Е.А., Мельникова Л.А., Мустафина Э.Н., Панкова Е.В., Равилов Р.Х., Садыкова С.В. Изучение сохранности штаммов Pseudomonas aeruginosa после долгосрочного хранения // Ветеринарный врач. 2024. № 6. С. 58–62. doi: 10.33632/1998-698X_2024_6_58

18. Кондратьева Е.И., Лошкова Е.В., Чернуха М.Ю., Шагинян И.А. Синегнойная инфекция в детском возрасте: современное состояние проблемы // Педиатрия. Журнал им. Г.Н. Сперанского. 2016. Т. 95. № 4. С. 187–197.

19. Манзенюк О.Ю., Фирстова В.В., Мухина Т.Н., Шемя кин И.Г. Молекулярные системы регулирования формирования биопленок бактерий Pseudomonas aeruginosa // Вестник РАМН. 2018. Т. 73. № 4. С. 244–251. doi: 10.15690/vramn1010

20. Tutun S, Yurdakul O. Importance of Pseudomonas aeruginosa in food safety and public health. TURJAF. 2023;11(10):2016-2026. doi: 10.24925/TURJAF.V11I10.2016-2026.6155

21. Li X, Gu N, Huang TY, Zhong F, Peng G. Pseudomonas aeruginosa: A typical biofilm forming pathogen and an emerging but underestimated pathogen in food proces sing. Front Microbiol. 2023;13:1114199. doi: 10.3389/fmicb.2022.1114199

22. Азямов М.А., Агалакова Т.В. Изучение цитокино терапевтического действия диальдерона в схеме лечения крупного рогатого скота при заболевании, вызванном Pseudomonas aeruginosa // Аграрная наука Евро-Северо-Востока. 2018. Т. 65. № 4. С. 93–97. doi: 10.30766/2072-9081.2018.65.4.93-97

23. Мовсумзаде М.М., Ахмедов И.М., Махмудова Л.Р. Cоздание микробиологически стабильного биотоплива // Нефтехимия. 2019. T. 59. № 2. С. 184–185. doi: 10.1134/S0028242119020126

24. Шепелин А.П., Сергеева А.Б., Полосенко О.В. Определение специфической активности питательных сред для Pseudomonas aeruginosa // Бактериология. 2017. Т. 2. № 1. С. 54–60. doi: 10.20953/2500-1027-2017-1-54-60

25. Марчихина И.И., Полосенко О.В., Шолохова Л.П., Храмов М.В., Мартовецкий М.Н. Питательная среда для селективного выделения Pseudomonas aerugi nosa – модифицированная Среда Блеск. Патент РФ на изобретение №2834480. 11.02.2025. Доступнопо: https://patents.google.com/patent/RU2834480C1/ru. Ссылка активна на 29.12.2025.