Полосенко Ольга Вадимовна – к.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории микробиологических и физико-химических методов анализа научно-производственного отдела профилактических и диагностических препаратов
Территория «Квартал А», д. 24, п. Оболенск, г.о. Серпухов, Московская обл., 142279
Olga V. Polosenko, Cand. Sci. (Biol.), Leading Researcher, Laboratory of Microbiological and Physicochemical Methods of Analysis, Science and Production Department of Preventive and Diagnostic Preparations
24 “Quarter A” Territory, Obolensk Settlement, Serpukhov City District, Moscow Region, 142279
Сёмина Анастасия Юрьевна – младший научный сотрудник лаборатории микробиологических и физико-химических методов анализа научно-производственного отдела профилактических и диагностических препаратов
Территория «Квартал А», д. 24, п. Оболенск, г.о. Серпухов, Московская обл., 142279
Anastasia Yu. Semina, Junior Researcher, Laboratory of Microbiological and Physicochemical Methods of Analysis, Science and Production Department of Preventive and Diagnostic Preparations
24 “Quarter A” Territory, Obolensk Settlement, Serpukhov City District, Moscow Region, 142279
Храмов Михаил Владимирович – к.м.н, заместитель директора по качеству и развитию
Территория «Квартал А», д. 24, п. Оболенск, г.о. Серпухов, Московская обл., 142279
Mikhail V. Khramov, Cand. Sci. (Med.), Deputy Director for Quality and Development
24 “Quarter A” Territory, Obolensk Settlement, Serpukhov City District, Moscow Region, 142279
Трухина Галина Михайловна – д.м.н., профессор, заведующая отделом микробиологических методов исследования окружающей среды
ул. Семашко, д. 2, г. Мытищи, 141014
Galina M. Trukhina, Prof., Dr. Sci. (Med.); Head of the Department of Microbiological Methods of Environmental Research
2 Semashko Street, Mytishchi, Moscow Region, 141014
Введение. По данным Всемирной организации здравоохранения Pseudomonas aeruginosa (синегнойная палочка) является микроорганизмом с высоким уровнем приоритетности в силу приобретенной антибиотикорезистентности и способности вырабатывать множество факторов вирулентности. Действующими нормативно-методическими документами регламентирован алгоритм обнаружения синегнойной палочки при санитарно-бактериологическом исследовании объектов. При этом приоритетной средой выступает среда Блеск лабораторного приготовления.
Цель исследования: усовершенствование методов выделения и идентификации P. aeruginosa (повышение эффек тивности выделения синегнойной палочки) за счет разработки оптимального состава сухой стандартной отечественной питательной среды для селективного выделения P. aeruginosa, модифицированной (среда Блеск).
Материалы и методы. Проанализированы нормативно-методические документы, регламентирующие к использованию перечень питательных сред для выявления P. aeruginosa. В этой связи использовались сухие питательные среды и среды лабораторного производства ФБУН ГНЦ ПМБ. Чувствительность, селективные и дифференцирующие свойства сред оценивались с использованием набора тест-штаммов микроорганизмов, полученных из Государственной коллекции патогенных микроорганизмов и клеточных культур (ГКПМ-Оболенск).
Результаты исследования. Разработана и внедрена в производство сухая отечественная питательная среда для селективного выделения P. aeruginosa, модифицированная (среда Блеск). Создана уникальная белковая основа (панкреатический гидролизат казеина, высушенный с твином, модифицированный), позволяющая повысить чувствительность среды и усилить специфический золотистый блеск ярко-красных колоний, который является важным диагностическим признаком при росте псевдомонад на этой среде. Оптимальные сочетания основных компонентов при разработке питательной среды Блеск способствовали эффективному росту всех тест-штаммов P. aeruginosa и высокой ингибиции грамположительных и большинства грамотрицательных бактерий, в том числе ТТХ-резистентных штаммов.
Заключение. Результаты исследований доказали, что сбалансированный состав среды Блеск обеспечивает рост и выявление низких концентраций P. aeruginosa и препятствует росту микробов-ассоциантов, что является значительным преимуществом при исследовании высококонтаминированных посторонней микрофлорой образцов, содержащих небольшое количество патогена.
Introduction: According to the World Health Organization, Pseudomonas aeruginosa is a high-priority microorganism due to its acquired antibiotic resistance and the ability to produce many virulence factors. Current regulatory documents and guidelines define the algorithm of Pseudomonas aeruginosa detection during bacteriological testing of objects. The laboratory prepared Blesk medium is of preference.
Objectives: To improve methods of P. aeruginosa isolation and identification (i.e. to increase the efficiency of the Pseudomonas aeruginosa isolation procedure) by developing an optimal composition of the modified standard dry domestic nutrient medium for selective isolation of P. aeruginosa (Blesk (“Shine”) medium).
Materials and Methods: We analyzed regulatory documents and guidelines on the use of nutrient media to detect P. aeruginosa and then tested dry nutrient media and the media produced in the laboratory of the State Research Center for Applied Microbiology and Biotechnology. Sensitivity, selective and differentiating properties of the media were evaluated using a set of reference strains of microorganisms provided by the State Collection of Pathogenic Microorganisms and Cell Cultures (SCPM-Obolensk).
Results: A dry modified domestic nutrient medium for selective isolation of P. aeruginosa (Blesk medium) has been developed and put into production. A unique protein base (casein pancreatic hydrolysate dried in the presence of Tween, modified) has been created that enhances the sensitivity of the medium and intensifies the specific golden shine of bright red colonies, which is an important diagnostic feature for pseudomonads growing on this medium. Optimal combinations of the main components when developing the Blesk nutrient medium fostered the growth of all P. aeruginosa reference strains and inhibited the growth of Gram-positive and most Gram-negative bacteria, including TTX-resistant strains.
Conclusion: Our findings proved that the balanced composition of the Blesk medium ensures the growth and detection of low concentrations of P. aeruginosa and prevents the growth of associative microbes, which is a significant advantage when testing the samples highly contaminated with foreign microflora and containing few pathogenic cells.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.