Результаты эпизоотологического мониторинга территорий Республики Крым и города Севастополя за 2015–2022 гг.

Введение. Природно-климатические, ландшафтные и социально-экономические условия Крымского полуострова благоприятны для существования природных очагов инфекций, общих для человека и животных. Практически на всей территории Крыма существуют природные очаги: туляремии, лептоспирозов, иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ), риккетсиозов, лихорадки Ку, Крымской-Конго геморрагической лихорадки (ККГЛ), лихорадки Западного Нила (ЛЗН), хантавирусных инфекций, клещевого энцефалита (КЭ), иерсиниоза, псевдотуберкулеза и др. [1][2].

Для Крыма характерны участки, занимающие небольшие площади, но имеющие большое разнообразие местообитаний, видов организмов и сообществ, где также существуют предпосылки для увеличения биоразнообразия при внесении нового патогена или переносчика (резервуара) особо опасных инфекционных заболеваний.

Климатические и ландшафтно-географические условия Крымского полуострова являются определяющими для биоразнообразия, способствуют существованию устойчивых паразитарных систем [3][4].

В связи с хозяйственной и рекреационной деятельностью в Крыму происходит преобразование естественных ландшафтов. Проводимые гидромелиорация, сооружение искусственных водоемов, выпас скота, туризм часто приводят к увеличению частоты контактов человека с природными очагами, что может способствовать изменению их пространственной структуры.

Практически вся территория Крыма интенсивно используется как рекреационная зона, считается потенциально опасной по природно-очаговым заболеваниям [5].

На протяжении длительного периода (1992–2013 гг.) изучение природной очаговости Крымского полуострова имело несистематический характер вследствие социально-экономического кризиса на Украине и отсутствия планомерного финансирования этой работы. С 2015 г. изучение природно-очаговых болезней в Крыму было возобновлено, что позволило актуализировать информацию о природных очагах на полуострове [6].

Цель исследования – уточнение границ и определение эпизоотологической активности природных очагов инфекционных болезней в Крыму, актуализация перечня возможных резервуарных хозяев, переносчиков, по результатам исследований 2015–2022 гг.

Материалы и методы. Проанализированы данные форм федерального государственного статистического наблюдения за инфекционными и паразитарными болезнями¹ и результаты эпизоотологического мониторинга проведенного ФБУЗ «ЦГиЭ в Республике Крым и городе федерального значения Севастополе» и ФГКУЗ «ПЧС Республики Крым» Роспотребнадзора с 2015 по 2022 г. на территории Республики Крым в очагах туляремии, лептоспирозов, иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ), риккетсиозов, лихорадки Ку, Крымской-Конго геморрагической лихорадки (ККГЛ), лихорадки Западного Нила (ЛЗН), хантавирусных инфекций, клещевого энцефалита (КЭ)².

Эпизоотологический мониторинг осуществляли в соответствии с методическими документами Роспотребнадзора³. Стандартными методами проводили учет и сбор мелких млекопитающих (ММ), иксодовых клещей, кровососущих комаров, а также погадок хищных птиц, отбор проб воды из внешних источников и другого зоолого-энтомологического материала⁴. Исследование проб зоолого-энтомологического материала проводили при помощи бактериологических, иммунологических и молекулярно-биологических методов⁵.

При учетах численности ММ методом ловушко-линий было накоплено более 10 тыс. ловушко-суток, при этом добыто 3 тыс. особей.

Сбор иксодовых клещей из природных биотопов проводили на флаг, также отбирали с животных. Индексы встречаемости клещей рассчитывались согласно МР 3.1.7.0250–21⁶. Абсолютная численность клещей рассчитывалась на флаго-час. Собранный материал доставлялся в лаборатории, где проводилось определение вида, стадии развития и пулирование. Пулы клещей формировали по принципу идентичности: по виду, полу, фазе развития, степени напитанности. В одну пробу включали от 1 до 10 экземпляров голодных имаго самцов или самок и от 1 до 30 нимф одного вида. Полунапитавшиеся особи пулировались от 3 до 5 экз. в зависимости от степени напитанности. Напитавшиеся особи исследовались индивидуально. Всего было собрано 13,7 тыс. клещей, которые были объединены в 3,1 тыс. пулов. Клещей в пулах отмывали в 70 % этаноле, затем в стерильном 0,15 М растворе NaCl и гомогенизировали с помощью лабораторного гомогенизатора TissueLyser LT. Перед исследованием суспензии клещей центрифугировали при 10 000 g в течение 1 мин.

Имаго кровососущих комаров отлавливали в местах их массового обитания (по методу Гуцевича или с использованием автоматической ловушки Mosquito Magnet). В одну пробу включали до 30 имаго и до 50 экземпляров личинок комаров одного вида.

Погадки хищных птиц (ушастая сова, болотная сова, сипуха и др.) собирали в зимнее время, возле мест зимовочных скоплений – по 50 штук с одной точки. Собрано более 3,6 тыс. погадок хищных птиц. После полного высушивания в течение 7 дней проводили разбор погадок. Костные останки ММ в каждой погадке отделяли от шерсти, определяли вид ММ. Погадки взвешивали, растирали в ступке до получения гомогенной смеси с добавлением 0,9 % раствора NaCl (рН 7,2) до 10 % концентрации. Полученную суспензию отстаивали в течение 10–15 минут, отбирали надосадочную жидкость через стерильный ватный тампон и переносили в микроцентрифужные пробирки объемом 1,5 мл для дальнейшего исследования методом иммуноферментного анализа (ИФА) с целью выявления туляремийного антигена.

Для постановки ИФА использовали: спектрофотометр (ридер) PR2100, промыватель (вошер) PW40, термошейкер (сухой инкубатор) AIP-4, с использованием диагностической тест-системы для выявления возбудителя туляремии в иммуноферментном анализе («ИФА-Тул-СтавНИПЧИ»).

Постановка ПЦР включала в себя экстракцию РНК/ДНК из исследуемых образцов (комплект реагентов для экстракции РНК/ДНК «Рибо-преп»), реакцию обратной транскрипции (комплект реагентов «Реверта-L») и амплификацию специфических генов, с учетом продуктов амплификации в режиме реального времени. Исследование методом ПЦР проводилось на амплификаторе ROTOR-GENE Q 6000.

В работе использовали географическую информационную систему QGIS 3.16.2.

Результаты. За анализируемый период при лабораторном исследовании зоолого-энтомологического материала в отношении туляремийной инфекции положительные пробы выявлены на территории 14 административных образований, лептоспирозов – 21, хантавирусов – 12, клещевого энцефалита – 2, ККГЛ – 7, ИКБ – 21, ЛЗН – 3. Также в некоторых районах эпизодически при исследовании материала от ММ и иксодовых клещей обнаруживались маркеры возбудителей Ку-лихорадки – 2, Марсельской лихорадки – 6, моноцитарного эрлихиоза (МЭЧ) – 1, гранулоцитарного анаплазмоза (ГАЧ) – 8 и др. При этом случаи заболеваний людей туляремией отмечены только в 6 административных образованиях, лептоспирозом – в 5, ИКБ – в 21.

Туляремия. За 8 лет при исследовании материала от ММ антитела к возбудителю туляремии выявлены в 11,6 % исследуемых проб, в 14 из 21 административной территории (Бахчисарайский, Красноперекопский, Ленинский, Нижнегорский, Раздольненский, Симферопольский, Советский, Кировский районы, г/о Армянск, Феодосия, Керчь, Судак, Ялта, гфз Севастополь). Удельный вес положительных находок в пробах клещей составил 1,1 %, в погадках хищных птиц – 0,3 %. В 2022 году выявлена эпизоотия туляремии в Степной и Горно-Предгорной зонах Крыма. Основную долю инфицированных особей (от всех инфицированных ММ) составляли: степная мышь (Sylvaemus witherbyi) – 46 %, домовая мышь (Mus musculus) – 21 %, общественная полевка (Microtus socialis) – 18 %. Также в этот год выявлено значительное количество положительных проб при исследовании иксодовых клещей – 10,2 %, а в некоторых районах – до 80 % проб. На долю проб Ixodes redikorzevi приходится 57 % (от всех проб исследованных клещей этого вида), Haemaphysalis parva – 42,9 %, Haemaphysalis punctata – 15,4 %, Dermacentor marginatus – 6,3 %, Hyalomma marginatum – 4,7 %.

На фоне активности природных очагов инфекции регистрировали единичные случаи заражений туляремией людей. В 2015 г. заболело 2 человека (по одному в Бахчисарайском и Ленинском районах), в 2016 г. – 3 больных, в т. ч. 2 – в г. Евпатории, заразившиеся в с. Добрушино Сакского района, и 1 – в г. Керчи, заразившийся в с. Луговое Ленинского района, в 2017 г. – 4 больных (2 в Ленинском районе (1 в пгт Ленино, заразившийся во время охоты в окрестностях с. Новониколаевка Ленинского района, 1 в с. Останино Ленинского района, обстоятельства и место заражения не установлены); 1 больной в г. Симферополе, заразившийся во время охоты в Феодосийском охотоугодье, 1 больной в г. Керчи, заразился при разделке зайца, подобранного в окрестностях с. Новоотрадное Ленинского района). В 2018–2020 г. случаи заболеваний туляремией у людей не регистрировались. В 2021 г. – один случай туляремии в гфз Севастополе. В 2022 г. – один случай у жителя (охотник) пгт Мирный, г/о Евпатория.

Лептоспирозы. Лептоспироносители среди ММ регистрировались практически на всей территории полуострова от 1,7 % положительных проб от всех исследованных в 2020 г. до 19 % в 2016 г., среднее за 5 лет – 2,1 %. В 2022 г. выявлено 7,6 % положительных проб. Маркеры лептоспир выявлены практически повсеместно у 9 видов ММ: малая белозубка (Crocidura suaveolens), обыкновенная (Microtus arvalis) и общественная (Microtus socialis) полевки, степная (Sylvaemus witherbyi), желтогорлая (Sylvaemus flavicollis), домовая (Mus musculus) и курганчиковая (Mus spicilegus) мыши, серая крыса (Rattus norvegicus), обыкновенный хомяк (Cricetus cricetus). Заболеваемость среди людей зарегистрирована в 19 из 21 административной территории, спорадическая, по 2–3 случая в год, при этом летальность – 1–2 случая в год.

Хантавирусы. При исследовании материала от ММ положительные результаты получены в 12 из 21 административной территории (67 % территории полуострова), выявлено 0,4 % от исследованных проб. В 2016 г. хантавирусный антиген обнаружен в 15 пробах (3 %) от ММ из Ленинского, Советского и Кировского районов, г/о Алушта, в 2019 г. – в 6 пробах ММ (1 %) (Симферопольский район и гфз Севастополь), в 2022 – РНК вируса Хантаан/Пуумала выявлена в 10 (8,1 %) пробах от ММ. В 2021 г. выявлен положительный образец от малой белозубки (Crocidura suaveolens), отловленной вблизи урочища Артезиан с. Новоотрадное, Ленинского района. При исследовании материала в ФБУН «ГНЦ ВБ “Вектор”» Роспотребнадзора выявлен новый хантавирус Artesian virus (ATSV), эпидемическая значимость которого в настоящее время не установлена.

За 8 лет в Республике зарегистрировано 4 случая геморрагической лихорадки с почечным синдромом (ГЛПС). В 2017 г. зарегистрирован 1 случай ГЛПС у туриста, прибывшего в г. Ялту из г. Рязани, в 2019 г. – 1 случай у прибывшего из Саратовской области, и впервые в Крыму (Черноморский район, с. Медведево) был зарегистрирован местный случай заболевания ГЛПС, что позволило предположить циркуляцию на территории полуострова хантавирусов, способных вызывать заболевания у человека. В 2021 г. зарегистрирован 1 местный случай ГЛПС у жителя г/о Ялта, пгт Никита.

Клещевой энцефалит (КЭ). По результатам мониторинговых исследований за последние 8 лет подтверждена эндемичность по КЭ 2 административных территорий: Бахчисарайский район и г/о Ялта (в 2016 г. выявили маркеры вируса КЭ при исследовании клещей, снятых с людей, в Бахчисарайском районе и территории, подчиненной г. Ялта). В Крыму периодически регистрируются единичные случаи КЭ у людей, в т. ч. и в Ялте в 2015 г. – 1. При эпизоотологическом мониторинге открытых стаций за 8 лет при исследовании клещей и ММ на наличие маркеров вируса КЭ положительные находки не выявлены.

Крым-Конго геморрагическая лихорадка (ККГЛ). За последние 8 лет маркеры возбудителя ККГЛ при исследовании клещей, собранных с сельскохозяйственных животных, выявлены в окрестностях 12 населенных пунктов 7 из 21 муниципального образования (33 % территории Крыма): г/о Алушта, г/о Феодосия, Ленинский, Черноморский, Красноперекопский, Красногвардейский, Джанкойский районы. Положительные находки регистрировались не только у основного переносчика вируса КГЛ Hyalomma marginatum, но и у клещей других видов – Rhipicephalus sanguineus, Rhipicephalus bursa, Haemaphysalis punctata, что свидетельствует об интенсивности эпизоотического процесса и может способствовать повсеместному распространению ККГЛ на территории Крыма. Всего зарегистрировано 2 случая ККГЛ у людей: в 2015 г. – 1 случай заражения ККГЛ в Крыму туристки из Воронежа, в 2017 г. – 1 местный случай заболевания ККГЛ в Ленинском районе (с. Вулкановка).

Иксодовые клещевые боррелиозы (ИКБ). За анализируемый период маркеры возбудителей ИКБ ежегодно и на всех административных выявляли при исследовании иксодовых клещей (4,1 % проб от исследованных) и ММ (2,9 % проб). Активные природные очаги ИКБ существуют в Бахчисарайском, Белогорском, Симферопольском районах, г/о Алушта, Судак, Ялта. Ежегодно повсеместно регистрируются случаи заболевания среди людей.

Инфекции, передающиеся комарами. Риски возникновения вспышек инфекционных заболеваний, передающихся комарами, возрастают, и это может быть связано со следующими факторами.

– Сезонными пиками численности местных видов кровососущих комаров в периоды благоприятных условий для их массового размножения (обильные осадки при оптимальных температурных показателях). Так, летом 2021 г. отмечена высокая численность – массовость окрыленных форм комаров в Джанкойском районе и г. Джанкое. Всего в отловах представлены 3 рода (Aedes, Anopheles, Culex), 5 видов комаров (Culex pipiens, Culex modestus, Aedes caspius, Aedes pulcritarsis, Anopheles claviger). В процентном соотношении на долю рода Aedes приходилось 75,8 %, Culex – 24,1 %, Anopheles – 0,1 %. Доля видов в общем сборе: Aedes caspius – 75,6 %, Culex modestus – 12,4 %, Culex pipiens – 11,7 %, Aedes pulcritarsis – 0,2 %, Anopheles claviger – 0,1 %.

– Обнаружением в Крыму ранее не встречавшихся видов комаров, которые являются переносчиками арбовирусных инфекций (желтая лихорадка, лихорадка Денге, чикунгунья, Зика, дирофиляриозы и др.). В связи с этим возможны эпидемические осложнения при завозе экзотических инфекций из эндемичных территорий.

В 2018 г. в Крыму были идентифицированы ранее не встречавшиеся комары вида Aedes koreicus. На территории Крыма и г/о Ялта в частности в 2019 г. впервые выявлены стабильно воспроизводящиеся популяции эпидемически значимых видов комаров Aedes аlbopictus (городское кладбище); старое (верхнее) кладбище), при этом видовое определение было подтверждено в результате полногеномного секвенирования в ФБУН «ГНЦ ПМБ». В последующем в 2020 и 2021 гг. определено расширение ареала распространения комара Aе. albopictus по территории Крыма – выявлено еще 2 территории, на которых ранее комары рода Aе. albopictus не регистрировались (пгт Гурзуф, старое кладбище, г. Алушта, кладбище.

Лихорадка Западного Нила (ЛЗН). С 2018 г. в Крыму регистрируются случаи заболевания ЛЗН: 2018 г. – 1 случай в с. Орловка, гфз Севастополь; 2019 г. – 10 случаев: 9 – в Белогорском районе, 1 – в гфз Севастополе, 2021 г. – 1 случай в г. Феодосии, в 2022 г. – по 1 случаю в с. Краснофлотское, Советский район, и в г. Керчи.

При зоолого-энтомологическом мониторинге (комары, клещи, ММ, птицы, КРС, лошади) маркеры вируса ЗН выявлены в комарах: в 2018 г. в Culex pipiens (гфз Севастополь), в 2019 г. (г. Белогорск L р. Culex), в 2022 г. в Ae. caspius, Culex modestus, Culex pipiens (СПЭБ Волгоградского НИПЧИ) в Красноперекопском районе (г. Красноперекопск, с. Ильинка) – 14 положительных пулов комаров. Маркеры возбудителя ЗН выявлены в 3 муниципальных образованиях (15 % территории Крымского полуострова).

Обсуждение. За последние 40 лет заболеваемость туляремией в Крыму спорадическая, в 80 % случаев источник заражения – заяц-русак (Lepus europaeus), группа риска – охотники и члены их семей. При этом с 2006 по 2014 г. случаи заболеваний туляремией не регистрировались. Эндемичной по туляремии является практически вся территория полуострова, что подтверждается результатами проведенного мониторинга за последние 8 лет. На территории Республики при исследовании культуры возбудителя туляремии, изолированной от клещей R. bursa установлена принадлежность F. tularensis subsp. holarctica к биовару I EryS [16]. На значительной части (70 %) территории Крыма по данным последних исследований выявлена активность очагов туляремии. С целью профилактики туляремийной инфекции в Республике Крым организована вакцинация населения. Вакцинацию и ревакцинацию за 2022 г. осуществили более 3 тыс. чел., 2023 – 1 тыс.

По ретроспективным данным на территории Крыма среди лептоспир, вызвавших заболевания людей, преобладали серогруппы Icterohaemorrhagiae (51 %), Canicola (16 %), Sejroе (14 %), Pomona (9 %). Рост заболеваемости в 2018 г. был связан с повышением численности синантропных грызунов, в том числе серой крысы [7]. На фоне активности природных очагов лептоспирозов регистрировали единичные случаи заболеваний людей и летальные исходы.

До недавнего времени считалось, что патогенность для человека циркулирующих в Крыму хантавирусов не установлена. С 1985 по 2016 г. случаи ГЛПС в Крыму не регистрировались, в ряде лет были завозными [17]. С 2019 г. на территории полуострова зарегистрированы местные случаи заболевания ГЛПС (Черноморский район (2019 г.), г/о Ялта (2021 г.).

Одной из особенностей хантавирусной инфекции является наличие у каждого хантавируса или его геноварианта, как правило, одного резервуарного хозяина [8]. На территории Крыма обитает серая крыса – резервуарный хозяин патогенного для человека хантавируса Сеул, распространенный в Дальневосточном регионе России. Другие виды грызунов, широко распространенные на территории Крыма, не являются резервуарными хозяевами известных к настоящему времени патогенных хантавирусов. В 2008 г. при исследовании материала от ММ был выявлен генетический материал хантавируса Tula на территории Крыма. По литературным данным, в зарубежных странах зарегистрированы единичные случаи заражения людей хантавирусом Tula [17–19]. Следовательно, существует целесо образность дальнейшего наблюдения за циркуляцией хантавирусов среди сочленов природных экосистем Республики. В 2014 г. РНК хантавирусов выявлена в 1 пробе степной мыши (Sylvaemus witherbyi) в Симферопольском районе (с. Николаевка) [5]. В результате исследования сывороток крови от здорового населения Крыма установлено, что 0,4–0,8 % исследуемых лиц имеют IgG к хантавирусам [8][9].

В настоящее время эндемичными по КЭ в Крыму остаются 11 территорий (55 % территории полуострова), в которых распространены I. ricinus [20][21].

Заболеваемость ККГЛ с 1967 до 2013 г. в Крыму не регистрировалась. В 2013 г. зафиксирован 1 случай заражения ККГЛ у жителя из г. Москвы. Референс центром по ККГЛ были описаны изоляты вируса ККГЛ (2015 г.) подгруппы «Крым» (Vd), которые выделены в отдельный кластер в пределах генотипа «Европа-1», отличающиеся от других штаммов генотипа и свидетельствующие о генетическом обмене между российскими, крымскими и балканскими штаммами [10][22–24]. В 2017 г. – 1 местный случай заболевания ККГЛ в Ленинском районе (с. Вулкановка). Серомониторинг здорового населения выявил 0,6 % положительных проб [9–12].

Маркеры возбудителей ИКБ получены при исследовании зоолого-энтомологического материала не только в лесной зоне среди основных эпидемически значимых переносчиков I. ricinus, но также в степной зоне среди клещей: I. redikorzevi, D. reticulatus, D. marginatus, H. punctata, H. marginatum, а также среди ММ: малая (C. suaveolens) и белобрюхая (C. leucodon) белозубки, серый хомячок (C. migratorius), обыкновенная (M. arvalis) и общественная (M. socialis) полевки, серая крыса (R. norvegicus), домовая (M. musculus), степная (S. witherbyi) и желтогорлая (S. flavicollis) мыши, что позволило уточнить перечень носителей и переносчиков, а также значительно расширить границы природных очагов ИКБ в Крыму [13].

Регистрация в 2018 г. популяции нового вида комаров Aedes koreicus [14], а также выявление в 2019–2022 гг. по всей территории южного берега Крыма устойчивой воспроизводящейся популяции инвазивного, эпидемически значимого вида комаров Ae. albopictus с тенденцией освоения новых территорий [15], а также вытеснением местных видов комаров диктует необходимость организации и осуществления дальнейшего энтомологического мониторинга кровососущих комаров в Крыму с учетом местообитаний с благоприятными условиями для данных видов.

Существование очага ЛЗН во многом связано с эпидзначимыми орнитофильными комарами Cx. pipiens и создавшимися благоприятными климатическими условиями для их обитания и размножения, а именно периодические интенсивные осадки, наличием мелких непроточных водоемов. Резервуаром вируса ЗН могут быть дикие перелетные птицы, концентрирующиеся в водоемах, на пути миграционного пролета птиц. В фауне наряду с оседлыми птицами представлены виды, прилетающие в Крым на летовку, зимовку или встречающиеся на весенне-осенних пролетах т. к. полуостров является частью Черноморско-Средиземноморского миграционного пути перелетных птиц [25–28]. Сероэпидемиологическим мониторингом здоровых лиц в 2019 г. выявлены иммунные к вирусу ЗН лица в 7,1 % образцов в Белогорском районе и в 16 % образцов в гфз Севастополе [9].

Таким образом, существование природных очагов Крымского полуострова, подтверждено многолетними (2015–2022 г.) результатами эпидемиолого-эпизоотологического мониторинга, при этом выявлены и уточнены основные источники, резервуары и переносчики циркулирующих в природных объектах возбудителей, установлен перечень территорий, на которых регулярно обнаруживаются возбудители природно-очаговых болезней среди ММ, клещей, комаров. На территории республики по результатам исследований полевого материала с 2015 по 2022 г. существуют природные очаги инфекционных болезней, которые можно рассматривать, как истинно эндемичные и энзоотичные (рисунок).

Заключение. Уточнены границы и подтверждено существование природных очагов туляремии, ККГЛ, хантавирусов, КВЭ, ИКБ, лептоспирозов, ЛЗН, Ку-лихорадки, Марсельской лихорадки, выявлена циркуляция возбудителей МЭЧ, ГАЧ и др. Определены основные источники и переносчики, значимые для поддержания существования природных очагов болезней, общих для человека и животных:

На основании полученных данных сформирован Перечень энзоотичных (эндемичных) территорий Крыма, на которых выявлена циркуляция возбудителей инфекций, общих для человека и животных, по результатам исследований полевого материала с 2015 по 2022 г.